Pseudotrombocytopenia zale?na od kwasu wersenowego (EDTA-PTCP) stanowi artefakt laboratoryjny, kt¨®ry mo?e prowadzi? do?otrzymania nieprawid?owych wynik¨®w krwi i poddania pacjenta zb?dnemu leczeniu.

?

Kt¨®re z poni?szych rozwi?za¨½ mog?yby zosta? zastosowane do skorygowania oznaczenia liczby p?ytek krwi w przypadku agregacji p?ytek spowodowanej EDTA w przypadku ma?op?ytkowo?ci?

• Ponowna kontrola z wykorzystaniem rozmazu krwi i oszacowaniem liczby p?ytek krwi
• Ponowna kontrola po dodaniu amikacyny
• Ponowna kontrola po zwi?kszeniu temperatury do 37¡ãC
• Bezpo?rednia ponowna kontrola roztworu bez antykoagulantu
• Ponowne badanie na innym analizatorze hematologicznym
• Ponowna kontrola z wykorzystaniem innych antykoagulant¨®w
  ?

Dostarczenie rzetelnych i dok?adnych wynik¨®w jest priorytetem dla os¨®b pracuj?cych w laboratoriach. Obecnie prowadzone badania kliniczne dotycz?ce rozwi?za¨½ dla EDTA-PTCP sugeruj?, ?e systemy hematologiczne Mindray, w kt¨®rych wykorzystywana jest technologia SF Cube, to rozwi?zanie, kt¨®re skutecznie wspiera Diagnost¨®w w okre?laniu prawid?owej liczby p?ytek krwi.

Studium przypadku klinicznego

Przypadek dotyczy 32-letniej pacjentki cierpi?cej na bezp?odno??. Pobranie krwi na EDTA. Po pobraniu krwi i poddaniu analizie (w ci?gu pi??dziesi?ciu pi?ciu minut), otrzymano ma?? liczb? p?ytek krwi (28 ¡Á 10⁹/l). Badanie wykonano metod? impedancji (PLT-I) z zastosowaniem popularnego systemu hematologicznego znanej firmy (urz?dzenie A). W badaniu mikroskopowym rozmazu potwierdzono agregacj? p?ytek wskazuj?c? na pseudotrombocytopeni? (PTCP). W kr¨®tkim odst?pie czasu ponownie zbadano t? sam? pr¨®bk? z wykorzystaniem metody CDR (PLT-O) na analizatorze BC-6800Plus firmy Mindray. Otrzymano znacznie wi?ksz? liczb? p?ytek krwi wynosz?c? 180 ¡Á 10⁹/l.

Podejrzewa si?, ?e ma?a liczba p?ytek krwi uzyskana w badaniu na?urz?dzeniu A wynika?a z EDTA-PTCP. Pacjentka zgodzi?a si? na?kolejne badanie z wykorzystaniem prob¨®wki na pr¨®bk? krwi z cytrynianem sodu. Pr¨®bk? przeanalizowano trzydzie?ci minut po jej pobraniu. W tabeli 1 podano parametry p?ytek krwi otrzymane r¨®?nymi metodami i z wykorzystaniem r¨®?nych urz?dze¨½.

Dodatkowe por¨®wnanie innych pr¨®bek

W badaniu pod mikroskopem rozmazu krwi rozrzedzonej antykoagulantami EDTA wykazano agregacj? p?ytek, natomiast nie wyst?powa?a ona w pr¨®bce krwi rozrzedzonej cytrynianem sodu. Pr¨®bki krwi poddano analizie w ci?gu czterech godzin od momentu ich pobrania zgodnie z instrukcjami producenta. Poza om¨®wionym wy?ej przypadkiem uzyskano i oceniono dane od kolejnych pi?ciu pacjent¨®w z EDTA-PTCA, kt¨®re przedstawiono w?tabeli 2.

Ko¨½cowe wnioski autora: u pacjent¨®w z wykryt? lub podejrzewan? pseudotrombocytopeni? EDTA zale?n?, technologia SF-Cube Mindray zapewnia prosty i skuteczny spos¨®b okre?lenia liczby p?ytek krwi w pr¨®bce krwi z dodatkiem antykoagulant¨®w EDTA.

Identyfikacja i charakterystyki pr¨®bek EDTA-PTCP

Pr¨®bki oznaczone na analizatorze hematologicznym flag? ?agregacja PLT¡± wykaza?y typow? karbowan? nieregularno?? i zygzakowate zako¨½czenie (rysunek 1) na histogramie p?ytek krwi. W badaniu mikroskopowym nie uwidoczniono r¨®wnie? satelityzmu p?ytkowego ani p?ytek olbrzymich.

Fa?szywie zani?ona liczba p?ytek krwi na?analizatorze BC-6800 w metodzie optycznego zliczania p?ytek (PLT-O)

?

Dwadzie?cia trzy pr¨®bki EDTA-PTCP w prob¨®wkach EDTA (z agregacj? p?ytek) przebadano w kanale impedancji (PLT-I (EDTA)) i?kanale do badania retikulocyt¨®w analizatora Mindray BC-6800 (PLT-O (EDTA)). Okaza?o si?, ?e wyniki PLT-O (EDTA) by?y podobne do zliczenia p?ytek krwi ponowne pobranych pr¨®bek w prob¨®wkach z?cytrynianem (PLT-I (cytrynian)), co stanowi potwierdzenie dok?adno?ci zastosowania metody PLT-O (EDTA) w przypadku problem¨®w z agregacj? p?ytek zwi?zanych z EDTA (rysunek 2).

EDTA-PTCP w systemie hematologicznym jednego z bardziej znanych producent¨®w Efekt rozdzielania:
czy wyst?puje r¨®wnie? w przypadku barwienia fluorescencyjnego?

Zliczanie p?ytek krwi metod? optycznego barwienia fluorescencyjnego jest dost?pne zar¨®wno w wysokiej klasy analizatorach hematologicznych (urz?dzenie B), jak i w analizatorach z serii BC-6000 Mindray. Metoda ta polega na stosowaniu barwnika fluorescencyjnego do barwienia kwas¨®w nukleinowych w p?ytkach krwi, umo?liwiaj?c rozpoznanie du?ych p?ytek, a tak?e wykluczenie fragment¨®w innych ni? p?ytki krwi, takich jak fragmenty erytrocyt¨®w, mikroerytrocyty lub fragmenty leukocyt¨®w.

W celu zweryfikowania, czy efekt rozdzielenia przy zliczaniu p?ytek krwi metod? optycznego barwienia fluorescencyjnego by? zale?ny od?zastosowania barwnika fluorescencyjnego, 17 z 23 pr¨®bek EDTA-PTCP w prob¨®wkach EDTA zbadano r¨®wnie? w kana?ach do?badania retikulocyt¨®w i impedancji urz?dzenia B. W tym przypadku nie by?o znacz?cej r¨®?nicy pomi?dzy liczb? p?ytek krwi w?kanale do badania retikulocyt¨®w i impedancji (rysunek 3). Tylko jedna z 17 pr¨®bek EDTA-PTCP wykaza?a wska?nik rozdzielenia wynosz?cy ponad 80%, a ?redni wska?nik rozdzielenia dla wszystkich 17 pr¨®bek EDTA-PTCP wynosi? 56% (rysunek 3).

Wnioski

Ko¨½cowe wnioski autora: Metoda zliczania p?ytek krwi poprzez optyczne barwienie fluorescencyjne na analizatorze hematologicznym BC-6800 jest skuteczna w korygowaniu fa?szywie zani?onej liczby p?ytek krwi u pacjent¨®w z EDTA-PTCP, a jej efekt rozdzielenia w pr¨®bkach EDTA-PTCP nie zale?y od?zastosowania barwnika fluorescencyjnego.

?

PTCP to nieunikniony problem w codziennej intensywnej pracy laboratorium. Technologia SF Cube Mindray umo?liwia detekcj? PLT-O (w oparciu o barwienie fluorescencyjne kwas¨®w nukleinowych w kanale RET) do korygowania liczby p?ytek krwi w?przypadku pseudozani?enia liczby p?ytek krwi spowodowanego przez EDTA. Metoda PLT-O jest dost?pna w automatycznych analizatorach hematologicznych z serii BC-6000 i na linii do analizy kom¨®rkowej CAL 8000/6000 Mindray.

Bibliografia:

[1] J. Deng i wsp. Mindray SF-Cube technology: An effective way for correcting platelet count in individuals with EDTA dependent pseudo thrombocytopenia. Clinica Chimica Acta 502 (2020) 99-101
[2] Y. Bao i wsp. Correction of spurious low platelet counts by optical fluorescence platelet counting of BC-6800 hematology analyzer in EDTA-de- pendent pseudo thrombocytopenia patients. Transl Cancer Res 2020;9(1):166-172