Znaczenie kliniczne

Pochodz?ce z megakariocyt¨®w p?ytki krwi (PLT) s? wytwarzane i dojrzewaj? w szpiku kostnym. Poza powszechnie znanymi procesami krzepni?cia i gojenia ran, PLT odgrywaj? r¨®wnie? wa?n? rol? w wyst?powaniu stan¨®w zapalnych z punktu widzenia stan¨®w zapalnych, odporno?ci i biologii nowotwor¨®w^[1]. Prawid?owe zakresy referencyjne PLT we krwi obwodowej wahaj? si? w?granicach 150-400¡Á10⁹/l. Gdy warto?? PLT jest ni?sza ni? 100¡Á10⁹/l, mo?e to by? wynikiem powszechnie wyst?puj?cego problemu klinicznego okre?lanego jako trombocytopenia (niski poziom p?ytek krwi)^[2].

?

Istnieje kilka przyczyn trombocytopenii, takich jak zmniejszone wytwarzanie p?ytek krwi, zwi?kszona destrukcja p?ytek, zwi?kszony wychwyt w ?ledzionie i rozrzedzenie krwin^[3]. Obecnie pe?na morfologia krwi (CBC) i badanie rozmazu krwi s? podstawowymi metodami diagnostycznymi stosowanymi we wst?pnej ocenie ma?op?ytkowo?ci^[2]. Dlatego prawid?owe zliczanie poziomu PLT za pomoc? automatycznego analizatora hematologicznego mo?e stanowi? podej?cie perspektywiczne, znacznie zmniejszaj?c cz?sto?? rozmaz¨®w krwi i oszcz?dzaj?c czas po?wi?cany na prac? w pracowni diagnostycznej, dzi?ki szybkiemu wykrywaniu pr¨®bek z trombocytopeni?.

Jednak prawid?owe zliczanie niskiego poziomu p?ytek krwi nie jest procesem prostym. Jak wysokiej klasy automatyczny analizator hematologiczny Mindray radzi sobie z pr¨®bkami o niskim poziomie PLT?

?

Rozwi?zanie oferowane przez Mindray

Technologia 1. Wysoce swoiste barwienie fluorescencyjne

Barwnik fluorescencyjny (barwnik FR) zosta? specjalnie zaprojektowany z mo?liwo?ci? natychmiastowej identyfikacji element¨®w docelowych. Nast?pnie, cz?steczka barwnika fluorescencyjnego ??czy si? z kwasem nukleinowym w p?ytkach krwi, unikaj?c zak?¨®ce¨½ ze strony ma?ych erytrocyt¨®w, fragment¨®w krwinek czerwonych i krwinek bia?ych oraz innych ma?ych cz?steczek. PLT wybarwione swoistym barwnikiem fluorescencyjnym przechodz? nast?pnie przez detektor laserowy w celu dokonania pomiaru optycznego. Wysoka swoisto?? i powinowactwo barwnika fluorescencyjnego zapewniaj?, ?e wi?zanie wewn?trz p?ytek krwi jest na tyle stabilne, ?e p?ytki mog? by? analizowane w wi?zce ?wiat?a laserowego. Dzi?ki temu nawet niewielkie ilo?ci PLT mog? by? dok?adnie mapowane i?zliczane z wykorzystaniem najnowszej technologii.?

Technologia 2. Detekcja optyczna o wysokiej rozdzielczo?ci

Ponadto, wysokiej klasy analizator hematologiczny oferowany przez Mindray ??czy technologi? t?umienia ?wiat?a odbitego z?SiPM (Silicon photomultiplier ¨C fotopowielaczem krzemowym), kt¨®ra charakteryzuje si? wysok? czu?o?ci? na sygna?y fluorescencyjne przy jednoczesnej minimalizacji szum¨®w t?a podczas detekcji optycznej. To znacznie poprawia granic? wykrywalno?ci cz?steczek, gdzie dolna granica dla ma?ych cz?steczek si?ga 1 ?m (?rednica 2 ?m jest definiowana jako ma?e PLT), zapewniaj?c, ?e wyniki pr¨®bki nie s? zak?¨®cane przez ma?e erytrocyty lub ich fragmenty.

Technologia 3. Dezagregacja PLT

Pseudotrombocytopenia jest spowodowana agregacj? p?ytek krwi in vitro w prob¨®wce z krwi? z EDTA, co mo?e prowadzi? do fa?szywie niskiej liczby PLT^[4].?W Centrum Bada¨½ i Rozwoju Mindray przeprowadzono wst?pne badania skupiaj?ce si? na mechanizmach aktywacji PLT, kt¨®ra jest regulowana g?¨®wnie przez kana? wapniowy, szlak kinazy tyrozynowej oraz GPIIb/IIIa. Ponadto w rozcie¨½czalniku DR znajduj? si? cz?steczki antagonist¨®w, kt¨®re blokuj? miejsca wi?zania na powierzchni PLT, co znacznie minimalizuje tworzenie si? agregat¨®w p?ytkowych. Bardziej szczeg¨®?owy mechanizm dezagregacji PLT zostanie opisany w nast?pnym rozdziale HemaBook.

Technologia 4. Automatyczne zliczanie 8¡ÁPLT-O

Mindray jest w trakcie sk?adania wniosku patentowego (patrz: poni?szy rysunek) dotycz?cego technologii automatycznego zliczania 8¡ÁPLT-O. Najpierw warto?? PLT-I uzyskana z kana?u impedancyjnego jest por¨®wnywana z?warto?ci? domy?ln? (50¡Á10⁹/ l). Je?li jest ona ni?sza od warto?ci granicznej, analizator mo?e automatycznie przed?u?y? czas zliczania maksymalnie do 8 razy w celu zebrania wi?kszej liczby cz?steczek PLT do dalszej analizy. Dodatkowo, system automatycznego zliczania 8¡ÁPLT-O mo?e wyeliminowa? inne czynniki zak?¨®caj?ce (np. pofragmentowane krwinki czerwone lub bia?e), kt¨®re cz?sto s? b??dnie zliczane jako PLT przez kana? impedancyjny. Nie wymaga dodatkowego pobierania pr¨®bek, r?cznej ingerencji, dodatkowych kana?¨®w i odczynnik¨®w. Technologia 8¡ÁPLT-O jest zar¨®wno wydajna, jak i skuteczna w prawid?owym zliczaniu niskiego poziomu PLT-O.

Bibliografia:

[1] Thrombocytopenia, Eun-Ju Lee, et al, Prim Care Clin Office Pract 43 (2016) 543¨C557
[2] Platelet disorders: an overview, M. Krishnegowda, et al, Blood Coagulation and Fibrinolysis, 2015, Vol 26 No 5.
[3] Thrombocytopenia: an update, K. J. Smock, et al, Int. Jnl. Lab. Hem. 2014, 36, 269¨C278
[4] Pseudothrombocytopenia, M Blonska, et al, Wiad Lek. 2001;54(5-6)